液相色譜儀(HPLC)是一種廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)、生物學(xué)和制藥等領(lǐng)域的高精度儀器。其通過不同物質(zhì)在流動相與固定相之間的相互作用，分離并定量分析混合物中的各組分。盡管液相色譜儀在實(shí)驗室中使用頻繁，但許多操作人員因缺乏經(jīng)驗或疏忽，容易出現(xiàn)一些常見誤區(qū)，導(dǎo)致實(shí)驗結(jié)果不準(zhǔn)確，甚至損壞設(shè)備。以下是一些常見的
液相色譜儀使用誤區(qū)及規(guī)避方法。
1.忽視儀器預(yù)熱和清洗
儀器在啟動時需要進(jìn)行預(yù)熱和清洗，以保證流動相的溫度和穩(wěn)定性。有些用戶為了節(jié)省時間，忽略了這一過程，直接進(jìn)行樣品分析。這樣可能導(dǎo)致基線不穩(wěn)定，影響分離效果。建議在啟動儀器后，先用純凈溶劑進(jìn)行沖洗和預(yù)熱，確保儀器各部件溫度穩(wěn)定后再開始樣品分析。
2.使用不適合的溶劑
溶劑的選擇直接影響分離效果與儀器的使用壽命。部分用戶在分析時不根據(jù)實(shí)驗要求選擇合適的溶劑，可能會導(dǎo)致溶劑與樣品不兼容，從而影響色譜峰形，甚至損壞柱子或儀器。一些溶劑如高粘度的有機(jī)溶劑或含水量較高的溶液，也容易對色譜柱產(chǎn)生負(fù)面影響。因此，選擇溶劑時應(yīng)根據(jù)分析需求和液相色譜儀的具體要求來確定，避免使用不兼容的溶劑。
3.不定期檢查流動相的過濾
流動相中的固體顆粒可能會堵塞流動相系統(tǒng)，影響分離效果，甚至損壞泵系統(tǒng)。許多操作人員忽視了定期過濾流動相，導(dǎo)致顆粒物進(jìn)入泵、色譜柱等部件，從而降低分離效率。建議使用適當(dāng)?shù)倪^濾器，定期檢查流動相的清潔度，確保其無雜質(zhì)。
4.忽視色譜柱的維護(hù)與更換
色譜柱是儀器中至關(guān)重要的部件，且具有一定的使用壽命。一些操作人員在色譜柱老化、污染或堵塞后仍繼續(xù)使用，導(dǎo)致分離效果不理想。為確保實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)定期檢查色譜柱的性能，及時更換或清洗色譜柱，避免因色譜柱問題造成的實(shí)驗誤差。
5.不合理設(shè)置流速與壓力
液相色譜分析時，流速和壓力的設(shè)置應(yīng)根據(jù)色譜柱的規(guī)格以及樣品性質(zhì)進(jìn)行優(yōu)化。過高的流速或壓力會導(dǎo)致分離不全，甚至損壞泵系統(tǒng)，而過低的流速則可能導(dǎo)致分離效率降低，或使分析時間過長。用戶應(yīng)根據(jù)實(shí)驗的具體需求，合理調(diào)整流速和壓力，避免設(shè)置過高或過低。
6.忽略儀器的定期校準(zhǔn)
儀器的性能隨時間變化，特別是在長時間使用后，可能出現(xiàn)壓力、流速、波長等方面的偏差。一些用戶往往忽視儀器的定期校準(zhǔn)，導(dǎo)致分析結(jié)果的準(zhǔn)確性下降。為了保持儀器的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，應(yīng)定期進(jìn)行儀器校準(zhǔn)，確保各項參數(shù)在規(guī)定范圍內(nèi)。
7.不當(dāng)?shù)臉悠分苽?br />
樣品的制備過程對于色譜分析結(jié)果至關(guān)重要。不當(dāng)?shù)臉悠分苽洌鐦悠窛舛冗^高、溶劑不純或過濾不全，都會影響色譜分離效果。有些操作人員未對樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅⑦^濾或脫氣處理，直接投入分析，這會導(dǎo)致峰形不規(guī)則、分離不充分等問題。為避免這種情況，樣品應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行適當(dāng)處理，以保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。
液相色譜儀作為高效的分析工具，只有在正確的使用和維護(hù)下才能發(fā)揮其較佳性能。操作人員應(yīng)避免上述常見誤區(qū)，嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作，定期進(jìn)行設(shè)備維護(hù)和保養(yǎng)。通過精細(xì)化管理和操作，確保實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的長期穩(wěn)定運(yùn)行。
