解一下影響毛細管電泳儀分離因素的原因

　　今天讓我們一起來了解一下影響毛細管電泳儀分離因素的原因，話不多說下面讓我們來了解一下吧。
 

　　1、緩沖液
 

　　緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定，在相同的pH下，不同緩沖試劑的分離效果不盡相同，有的可能相差甚遠。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。
 

　　毛細管電泳儀
 

　　緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質的離子強度，從而影響Zeta電勢，而Zeta電勢的變化又會影響到電滲流。緩沖液濃度升高，離子強度增加，雙電層厚度減小，Zeta電勢降低，電滲流減小，樣品在毛細管中停留時間變長，有利于遷移時間短的組分的分離，分析效率提高。同時，隨著電解液濃度的提高，電解液的電導將大大高于樣品溶液的電導而使樣品在毛細管柱上產(chǎn)生堆積的效果，增強樣品的富集現(xiàn)象，增加樣品的容量，從而提高分析靈敏度。
 

　　但是，電解液濃度太高，電流增大，由于熱效應而使樣品組分蜂形擴展，分離效果反而變差。此外，離子還可以通過與管壁作用以及影響溶液的粘度、介電常數(shù)等來影響電滲，離子強度過高或過低都對提高分離效率不利。
 

　　2、pH值
 

　　緩沖體系pH的選擇依樣品的性質和分離效率而定，是決定分離成敗的一大關鍵。不同樣品需要不同的pH分離條件，控制緩沖體系的pH值，一般只能改變電滲流的大小。
 

　　pH能影響樣品的解離能力，樣品在極性強的介質中離解度增大，電泳速度也隨之增大，從而影響分離選擇性和分離靈敏度。pH還會影響毛細管內壁硅醇基的質子化程度和溶質的化學穩(wěn)定性，pH在4-10之間，硅醇基的解離度隨pH的升高而升高，電滲流也隨之升高。因此，pH為分離條件優(yōu)化時不可忽視的因素。
 

　　3、分離電壓
 

　　在CE中，分離電壓也是控制電滲的一個重要參數(shù)。高電壓是實現(xiàn)CE快速、高效的前提，電壓升高，樣品的遷移加大，分析時間縮短，但毛細管中焦耳熱增大，基線穩(wěn)定性降低，靈敏度降低;分離電壓越低，分離效果越好，分析時間延長，峰形變寬，導致分離效率降低。
 

　　因此，相對較高的分離電壓會提高分離度和縮短分析時間，但電壓過高又會使譜帶變寬而降低分離效率。電解質濃度相同時，非水介質中的電流值和焦耳熱均比水相介質中小得多，因而在非水介質中允許使用更高的分離電壓。
 

　　4、溫度
 

　　溫度影響分離重現(xiàn)性和分離效率，控制溫度可以調控電滲流的大小。溫度升高，緩沖液粘度降低，管壁硅輕基解離能力增強，電滲速度變大，分析時間減短，分析效率提高。但溫度過高，會引起毛細管柱內徑向溫差增大，焦耳熱效應增強，柱效降低，分離效率也會降低。
 

　　5、添加劑
 

　　在電解質溶液中加入添加劑，例如中性鹽、兩性離子、表面活性劑以及有機溶劑等，會引起電滲流的顯著變化。
 

　　表面活性劑常用作電滲流的改性劑，通過改變濃度來控制電滲流的大小和方向，但當表面活性劑的濃度高于臨界膠束濃度時，將形成膠束。
 

　　加入有機溶劑會降低離子強度，Zeta電勢增大，溶液粘度降低，改變管壁內表面電荷分布，使電滲流降低。在電泳分析中，緩沖液一般用水配制，但用水一有機混合溶劑常常能有效改善分離度或分離選擇性。